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            液態(tài)奶和奶粉中三聚氰胺的測定
            更新時間:2020-04-26   點擊次數(shù):3561次

            依據(jù) GB /T 22388-2008

            1. 前處理

            預處理:
            液態(tài)奶:取原料乳5g,于50ml 離心管中,分別加入500ul,10ppm 的標準液(保證每kg 原料乳中各含1mg 標樣)、15ml 0.1%三氯yi酸溶液和5ml 乙腈,渦旋1min, 超聲20min,4500r/min 離心15min。取出上清液,用0.1%三氯yi酸定容至25ml 容量瓶中。振蕩均勻,從中取5ml,再加入5ml 水作為上樣液。

            奶粉:取奶粉5g,于50ml 離心管中,分別加入500ul,10ppm 的標準液(保證每kg 奶粉中各含1mg 標樣),15ml 0.1%三氯yi酸溶液和5ml 乙腈,渦旋1min,超聲1h,放置冰箱中2h,4500r/min 離心15min。取出上清液,用0.1%三氯yi酸定容至25ml 容量瓶中。振蕩均勻,從中取5ml,再加入5ml 水作為上樣液。
            Ps:由于奶粉不含水份,相對與液態(tài)奶,脂類與其他添加成分可能更多,因此增加超聲時間及冷卻步驟,以保證蛋白沉降*。

            凈化:
            固相萃取小柱:
            InertSep MPC 3ml/60mg 貨號5010-27121 或WondaSep MPC 3ml/60mg 貨號5010-MPC
            活化:3ml 甲醇和5ml 水
            上樣:前處理后,備用的上樣液
            淋洗:3ml 水、3ml 甲醇
            洗脫:6ml 5%氨水-甲醇
            濃縮復溶:40 度氮氣吹干,加入1ml 3Mmol/L 醋酸銨溶液:乙腈=20:80 的流動相,濾膜
            過濾后,HPLC 分析。

            2. 色譜分析

            色譜柱:Inertsil HILIC 5um 4.6*250mm
            流動相:A—2 mmol/L 醋酸銨溶液 B—乙腈
            梯度表如下:

            表1 梯度表

            時間2Mmol/L 醋酸銨溶液乙腈(%)
            02080
            102080
            10.015050
            205050
            20.012080
            302080

            流速:1.0ml/min 柱溫:40℃ 進樣量:10ul 檢測波長:240nm
            儀器:Shimadzu LC-20A

            3.基質加標回收率結果

            三次平行實驗結果(基質加標濃度均為1mg/kg):
            —液態(tài)奶

            表2 液態(tài)奶加標回收率

            名稱基質加標
            回收率%RSD%
            三聚氰胺98.380.89

            —奶粉

            表2 液態(tài)奶加標回收率

            名稱基質加標
            回收率%RSD%
            三聚氰胺97.711.93

            4. 結論

            在此實驗條件下,采用固相萃取小柱InertSep MPC 3ml/60mg或WondaSep MPC 3ml/60mg 分 析原料乳與奶粉中的三聚氰胺,回收率*要求。

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